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发表于 2013-8-16 16:04:31
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网上当来的Y染色体微缺失小知识 4 A3 N# v3 ?; m* U
* g, N9 l9 b' f" R. j0 X. ] 一、背景! M- N! ?5 @; H
全球不育夫妇占已婚夫妇10%-15% 9 \6 \( ^1 z, C
其中男性原因占40%-50%0 a4 U! L. h; k$ ^; ?7 p
遗传因素占男性不育的30%
7 A N, f6 [; \1 J10%-15%的特发性无精症存在Y染色体的微缺失
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二 Y染色体微缺失相关基因
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Y染色体是最短的近端着丝粒染色体,是男性特有的染色体。1976年， Tiepolo和Zuifaidi首先提出Y染色体上有多个基因参与生精过程。多年研究，发现男性特有的Y染色体上面存在一个关键的与生育相关的因子的区域，称为AZF区。目前认为在AZF区上存在四个精子发生亚区（AZFa、AZFb、AZFc、AZFd），各亚区包含的位点在男性生殖细胞 AZFa、AZFb、AZFc、AZFd），各亚区包含的位点在男性生殖细胞发育的不同时期起着不同的作用，位点的缺失可致患者表现为少、弱精症或无精症从而引发不育。一般认为，Y染色体的近端缺失（涉及AZFa和AZFb），表现以唯支持细胞综合症为主的严重生精障碍，Y染色体的远端缺失（涉及AZFd和AZFc），可残留岛状的生精正常区域。对无精症患者中，对检查睾丸过小或睾丸活检仍无精子患者，一般不再行AZF基因检测。总之，开展染色体和AZF检测，可全面评价男性不育遗传缺陷，从而更好的解释发病原因，提供遗传咨询和指导临床诊疗。 % s. |& U( H: X8 J& r" O
9 k2 w) U4 D0 q1996年将 AZF区划分为3个区:AZFa、AZFb、AZFc。1999年研究发现在AZFb和AZFc间存在AZFd。研究发现,在Y染色体AZFa、AZFb、AZFc3个区至少发现 15个与精子发生相关的基因，AZFd区尚未发现相关基因。
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AZFa缺失的病人，主要表现为唯支持细胞综合征伴睾丸体积缩小,无精子生成 ；' Z$ c0 T6 T& N4 V
AZFb缺失的病人，主要表现为生精过程阻滞在精母细胞阶段,无精子生成；
* c# s: v& L! r. hAZFc区缺失病人表现多样化,会出现无精子症和少精子症的不同临床表现。 4 D& p8 ~. U- c! P5 l
, l5 G) c w/ }' @: y! SAZFa缺失患者 33%为严重少精子,67%表现为无精子；4 s' k9 J1 k+ u9 p; }$ m; M
AZFb缺失患者 9%轻度少精子, 23%严重少精子, 68%无精子；
+ a" W. c* u. d5 gAZFc缺失患者 46%严重少精子,54%无精子；6 \8 [1 w4 R. e" N: b0 p/ Q
AZFa-b缺失患者 50%严重少精子50%无精子；
( _# z- ^0 f: b2 [7 h& v% l( _AZFa-c缺失患者100%无精子；3 F# w4 q5 w- m; [
AZFb-c缺失患者 4%严重少精子,96%无精子。9 I" X X' K/ ]( d
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AZFa缺失较为少见 ,占整个AZF缺失4.9%。整个AZFa区域缺失通常表现为SCOS,为绝对的无精子症。若患者为AZFa缺失,不建议做睾丸穿刺寻找精子进行卵细胞胞质内单精子注射，目前只能寻求供精人工授精技术来获得妊娠。9 w8 \3 {* D9 s M" n/ }
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AZFb缺失也不多见,占整个AZF缺失15.8%。缺失的典型睾丸组织学特征是精子成熟障碍,主要停滞在初级精母细胞阶段。但也有SCOS的报告，睾丸穿刺不能获得精子,因此 ,临床上也不建议做睾丸穿刺。0 m$ |. k' y" t6 m6 Q. C
) |# A* d9 A( jAZFc缺失是临床上最常见的 AZF缺失类型,临床和睾丸组织学表型多种多样。一般说来,AZFc缺失患者尚存精子生成能力。AZFc缺失见于无精子症或严重少精子症患者,罕见情况下,也可以在自然状态下遗传给其男性后代。在无精子症患者中,AZFc缺失者通过睾丸精子穿刺获得精子的机会比其他缺失类型大,同时可以从睾丸穿刺获得精子进行ICSI受孕 ,但这些患者的男性后代都将是AZFc缺失的携带者，建议在进行试管婴儿前,行遗传咨询。2 e& E" t; L0 P$ N
# _, c$ ?4 S2 O. D9 z( T三 AZF微缺失与其他不育因素
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; F) p, A1 n! h; U$ t0 WAZF微缺失与隐睾症AZF微缺失与精索静脉曲张. ~; g1 @ X$ Z8 `4 d) E
AZF微缺失与双侧输精管缺如AZF微缺失与睾丸支持细胞6 R; x# `2 l5 G: x$ q
AZF微缺失与生殖激素异常AZF微缺失与其他不育因素
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" `: \% A2 X/ ?# F. S6 S6 K* R% o 四 Ｙ染色体微缺失的检测方法& L% t) P. j; ?
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核型分析总体上来说操作繁琐、效率不高,尤其是难以检测出微小的染色体异常或变异。荧光原位杂交(Fluorescence isitu hybridization, FISH)虽然有更高的分辨率,但其检测的范围为20 kb-5 Mb,对于微小的染色体缺失也难以检测,且繁琐的实验操作与高昂的成本也限制了FISH技术在临床中的广泛应用。目前关于Ｙ染色体微缺失的检测方法最常用的是多重聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术，而检测的位点有很多，但有研究表明SY84、SY152、SY127、SY147/SY254-DAZ和RB SY147/SY254MY1这６个基因标志物能覆盖大部分已发现的微缺失，其他的位点序列灵敏度比较低,当然不同种族间可能会有轻微的差异。
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+ C" T! S! T: l- z# i8 c由于不同实验室采用 PCR方法不同,导致实验结果各异。为提高诊断质量，欧洲男科协会( EAA )和欧洲分子遗传实验质控网( EMQN)在1999年、2004年先后颁先后颁布了第1版和第2版Y染色体微缺失分子诊断指南，规范了检测微缺失时的Y染色体序列标签点(sequencetargetedsites，STS)与所采用的内外对照方法。选择位于Y染色体短臂(Yp)的睾丸决定基因(SRY)和锌指蛋白基因(ZFX／ZFY )为对照。Z既存在于x染色体短臂，也存在于Yp，其与SRY一起构成2个目前推荐使用的参照基因。每个AZF区域至F区域至少设置2个 S T S位点才能正确有效。6 q- |5 Q3 M' o' W
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其推荐的STS为AZFa：sY84，sY86；AZFb：sY127，sY134；AZFc：sY254， sY255。多重PCR实验中的引物应包括：sY14(SRY)，zFY，sY84，sY86，sY127，sY134，sY254，sY255。- M) F. L; l9 |! C
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五 染色体微缺失相关基因研究的意义
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1 用于原发性无精或少弱精症的遗传咨询。通过遗传病因诊断，找到男性不育的遗传病因，则可避免不必要的药物及手术治疗。
& ^1 h: f3 j# _4 ^# R2 进行辅助生育之前对其进行遗传病因诊断，可尽量避免将不良基因传递给下一代。1 }) F& K# C8 X% ^( k
3 辅助生育精子质量筛选。4 为未来的基因治疗提供理论依据。
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) Z, i- w2 h/ G为临床治疗各种男性不育提供分子或细胞水平的依据。Ｙ染色体微缺失虽然不会影响身体健康和心理健康，但会导致后代出现同样的不育问题。对于不育夫妇，特别是无精子症和严重少精症的不育夫妇，虽然其可以通过 ICSI达到妊娠的目的，并且有正常的胚胎发育和足月妊娠，但在接受ICSI治疗之前有必要进行Ｙ染色体微缺失的检测以及移植前遗传诊断，尽量选择女婴，切断遗传途径。
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+ ~% t o! B! h* W另外，有研究发现AZFc区域缺失的少精子症患者，其精子数目有进行性下降的趋势，最后发展为无精子症。因此，对AZFc区域缺失的少精子症患者,应及早进行治疗或将其精液进行冷冻保存。 |
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发表于 2013-8-16 16:00:14
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发表于 2013-8-20 08:55:36
