|
4#
楼主 |
发表于 2013-8-16 16:04:31
|
只看该作者
网上当来的Y染色体微缺失小知识 1 X$ w+ U' a- \0 C' J z# ]6 t
& w& |! `( I( q( h
一、背景
: f9 O# x0 T" U- ?# z7 W3 F( T4 P全球不育夫妇占已婚夫妇10%-15% : O Q2 c( x2 L/ H, M* k# f1 ?# P; h
其中男性原因占40%-50%
1 h' Z( r1 X0 _' b遗传因素占男性不育的30% / y; X0 e3 {' {! ?; w! S
10%-15%的特发性无精症存在Y染色体的微缺失 6 i5 F' X* W$ g
( I. @& F1 Y) A7 @
二 Y染色体微缺失相关基因
4 @, M) u- T7 S1 t+ J, K+ d ; k: O" u# L* g5 B6 x
Y染色体是最短的近端着丝粒染色体,是男性特有的染色体。1976年, Tiepolo和Zuifaidi首先提出Y染色体上有多个基因参与生精过程。多年研究,发现男性特有的Y染色体上面存在一个关键的与生育相关的因子的区域,称为AZF区。目前认为在AZF区上存在四个精子发生亚区(AZFa、AZFb、AZFc、AZFd),各亚区包含的位点在男性生殖细胞 AZFa、AZFb、AZFc、AZFd),各亚区包含的位点在男性生殖细胞发育的不同时期起着不同的作用,位点的缺失可致患者表现为少、弱精症或无精症从而引发不育。一般认为,Y染色体的近端缺失(涉及AZFa和AZFb),表现以唯支持细胞综合症为主的严重生精障碍,Y染色体的远端缺失(涉及AZFd和AZFc),可残留岛状的生精正常区域。对无精症患者中,对检查睾丸过小或睾丸活检仍无精子患者,一般不再行AZF基因检测。总之,开展染色体和AZF检测,可全面评价男性不育遗传缺陷,从而更好的解释发病原因,提供遗传咨询和指导临床诊疗。 1 c- _' w2 u/ x, h j2 F& A4 T( o
5 N4 M* s- E7 W; Y# P
1996年将 AZF区划分为3个区:AZFa、AZFb、AZFc。1999年研究发现在AZFb和AZFc间存在AZFd。研究发现,在Y染色体AZFa、AZFb、AZFc3个区至少发现 15个与精子发生相关的基因,AZFd区尚未发现相关基因。+ X7 ~$ ~9 x$ P* [
3 x* k; d; }0 l# ~& M3 u
AZFa缺失的病人,主要表现为唯支持细胞综合征伴睾丸体积缩小,无精子生成 ;
1 C: Y1 J- }1 ~! Q5 `AZFb缺失的病人,主要表现为生精过程阻滞在精母细胞阶段,无精子生成; 0 e' M! }6 h3 {, E& w% H1 O0 j
AZFc区缺失病人表现多样化,会出现无精子症和少精子症的不同临床表现。 . {/ D3 X! J# q- d7 g5 t
; d% v1 h. M6 e4 O
AZFa缺失患者 33%为严重少精子,67%表现为无精子;0 x- W# ^* k5 a- k: C5 e7 l
AZFb缺失患者 9%轻度少精子, 23%严重少精子, 68%无精子;
# K) H7 {* n# @) f' C# Z. M6 v8 HAZFc缺失患者 46%严重少精子,54%无精子;
1 m4 R- e, K+ r2 Q, T3 W+ s9 KAZFa-b缺失患者 50%严重少精子50%无精子;
! K9 A% D6 k y2 i- _2 E, z* CAZFa-c缺失患者100%无精子;" B0 L* }) c8 }) m5 w6 m
AZFb-c缺失患者 4%严重少精子,96%无精子。: t! u- K& Q7 \* L* j: ?' {
# L! q: r% j# V t+ ^7 v1 W; t
AZFa缺失较为少见 ,占整个AZF缺失4.9%。整个AZFa区域缺失通常表现为SCOS,为绝对的无精子症。若患者为AZFa缺失,不建议做睾丸穿刺寻找精子进行卵细胞胞质内单精子注射,目前只能寻求供精人工授精技术来获得妊娠。* l, t. \8 e; A2 E, n I- y$ [8 P4 y5 H. }
# `# V; l! y9 @
AZFb缺失也不多见,占整个AZF缺失15.8%。缺失的典型睾丸组织学特征是精子成熟障碍,主要停滞在初级精母细胞阶段。但也有SCOS的报告,睾丸穿刺不能获得精子,因此 ,临床上也不建议做睾丸穿刺。
1 S+ P6 O% ^+ K3 @/ L! @# E ! @; A) p7 A" J+ `# z
AZFc缺失是临床上最常见的 AZF缺失类型,临床和睾丸组织学表型多种多样。一般说来,AZFc缺失患者尚存精子生成能力。AZFc缺失见于无精子症或严重少精子症患者,罕见情况下,也可以在自然状态下遗传给其男性后代。在无精子症患者中,AZFc缺失者通过睾丸精子穿刺获得精子的机会比其他缺失类型大,同时可以从睾丸穿刺获得精子进行ICSI受孕 ,但这些患者的男性后代都将是AZFc缺失的携带者,建议在进行试管婴儿前,行遗传咨询。) s. A$ s1 I% S2 F4 t
# D1 d& e& a. \9 H g( S& _$ p9 G2 S
三 AZF微缺失与其他不育因素
% E. C+ T9 {$ s+ E( D T6 R
8 O4 Z' c( ?$ Y& x/ y- X0 q" kAZF微缺失与隐睾症AZF微缺失与精索静脉曲张0 b) x$ b7 b# [$ L: b k
AZF微缺失与双侧输精管缺如AZF微缺失与睾丸支持细胞* a% e0 r. ?" x
AZF微缺失与生殖激素异常AZF微缺失与其他不育因素
- H* u4 n& n, Z+ A; m * N! t; h2 u8 V
四 Y染色体微缺失的检测方法
8 S3 B9 d; d% q0 \9 W 5 b+ r8 g& j& m9 X( m( E
核型分析总体上来说操作繁琐、效率不高,尤其是难以检测出微小的染色体异常或变异。荧光原位杂交(Fluorescence isitu hybridization, FISH)虽然有更高的分辨率,但其检测的范围为20 kb-5 Mb,对于微小的染色体缺失也难以检测,且繁琐的实验操作与高昂的成本也限制了FISH技术在临床中的广泛应用。目前关于Y染色体微缺失的检测方法最常用的是多重聚合酶链反应 (PCR)技术,而检测的位点有很多,但有研究表明SY84、SY152、SY127、SY147/SY254-DAZ和RB SY147/SY254MY1这6个基因标志物能覆盖大部分已发现的微缺失,其他的位点序列灵敏度比较低,当然不同种族间可能会有轻微的差异。/ q+ O0 I: P9 I7 a$ N0 c
- C/ R7 a* Y6 W7 J- \6 a
由于不同实验室采用 PCR方法不同,导致实验结果各异。为提高诊断质量,欧洲男科协会( EAA )和欧洲分子遗传实验质控网( EMQN)在1999年、2004年先后颁先后颁布了第1版和第2版Y染色体微缺失分子诊断指南,规范了检测微缺失时的Y染色体序列标签点(sequencetargetedsites,STS)与所采用的内外对照方法。选择位于Y染色体短臂(Yp)的睾丸决定基因(SRY)和锌指蛋白基因(ZFX/ZFY )为对照。Z既存在于x染色体短臂,也存在于Yp,其与SRY一起构成2个目前推荐使用的参照基因。每个AZF区域至F区域至少设置2个 S T S位点才能正确有效。! E7 X6 ~4 E. c$ i
- o' y$ h- g! b' S& I: P
其推荐的STS为AZFa:sY84,sY86;AZFb:sY127,sY134;AZFc:sY254, sY255。多重PCR实验中的引物应包括:sY14(SRY),zFY,sY84,sY86,sY127,sY134,sY254,sY255。
- E$ p6 J1 x1 y# L9 y- O
" e+ B$ y4 L) S3 x6 t) F五 染色体微缺失相关基因研究的意义
) D) p D7 @8 v G+ ?% I8 q; p
4 e" z' W1 A7 }' e3 p# o# `2 G3 e! V5 l1 用于原发性无精或少弱精症的遗传咨询。通过遗传病因诊断,找到男性不育的遗传病因,则可避免不必要的药物及手术治疗。 % F8 `2 _# v/ f( R
2 进行辅助生育之前对其进行遗传病因诊断,可尽量避免将不良基因传递给下一代。4 j1 ^, b/ }. x5 c4 v
3 辅助生育精子质量筛选。4 为未来的基因治疗提供理论依据。6 Q0 ^6 m9 w* ~" T r* ^! c6 X% v
; j# `9 R/ z2 G# E3 h! C# c为临床治疗各种男性不育提供分子或细胞水平的依据。Y染色体微缺失虽然不会影响身体健康和心理健康,但会导致后代出现同样的不育问题。对于不育夫妇,特别是无精子症和严重少精症的不育夫妇,虽然其可以通过 ICSI达到妊娠的目的,并且有正常的胚胎发育和足月妊娠,但在接受ICSI治疗之前有必要进行Y染色体微缺失的检测以及移植前遗传诊断,尽量选择女婴,切断遗传途径。
: A6 A. Z [9 L/ F* s- Q2 v- a' S
+ B' J$ p* N* t) b另外,有研究发现AZFc区域缺失的少精子症患者,其精子数目有进行性下降的趋势,最后发展为无精子症。因此,对AZFc区域缺失的少精子症患者,应及早进行治疗或将其精液进行冷冻保存。 |
|