人类精子冷冻的历史发展

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人类精液冷冻的历史可以追溯至200多年前，1776年，意大利牧师Spallanzanidi首次观察到人的精子在雪中冷冻30min，用适当方法复温后，部分精子仍能恢复活力，但他的发现当时并未引起人们的重视。19世纪中叶，Mouteyazza在-15℃的条件下冻存精子取得成功，并首次提出“精子库”的概念，倡导建立冷冻精子库，冷冻贮存战争期间赴前方打仗士兵的精子，以备其牺牲后运用冷冻贮存的精液供其妻子受孕。限于当时条件，低温冷冻的精子大多死亡，精子复苏后效果不理想，难以实际应用。精子冷冻作为一项应用技术进行深入的研究，始于20世纪，尤其是液氮与甘油在精子冷冻贮存方面的应用，大大促进了精子库技术的发展。1938年，Tahnel发现贮存于-79℃环境中的精液，40d后解冻，尚有部分精子能够存活。1939年，Phillips首次报道卵黄可以保护精子对抗冷冻休克的影响；1942年，Hoagland和Pricus用快速冷冻法将人精液贮存于液氮中（-196℃），复温后得到20%～40%的存活率，技术改进后存活率可以得到提高。

1938～1942年，是精子库技术取得第一次突破的时代。1949年，Polge发现了精子冷冻保护剂—甘油，从此，精液冷冻贮存的研究取得了突破性的发展，迄今为止，甘油仍是精子冷冻保护剂中最重要的成分，这可称为精子库技术的第二次突破。1953年，Sherman以甘油作为冷冻保护剂，对精液进行冷冻贮存，3个月后得到67%的存活率，并首先将冷冻精液用于临床人工授精且获得成功。从1954～1963年，Sherman发明了一种简便且行之有效的精子冷冻方法，即以10%的甘油做冷冻保护剂，再将混合后的精液悬于液氮蒸气中，以16～25℃/min降温速率降温至-75℃，然后再浸于液氮中贮存，这一手工精液冷冻方法，直至目前仍然是人们广泛使用的方法。自20世纪60年代美国首创精子库后，许多国家相继建立人类精子库，并大量应用于临床。从1963～1973年10年间，全世界大约出生了1000例左右通过冷冻精液人工授精的婴儿，这些冷冻精液多数冷冻期在3年以内，少数几例贮存10年以上。
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) r6 p9 J* R' B" v  s' r+ e5 [1973年，Sherman报道，其进行的571例冷冻精液人工授精分娩婴儿中，先天异常仅有7例（占1.2%），明显低于自然妊娠先天异常发生率（3%）。1975年，Augustol报道的103例冷冻精液人工授精妊娠中，自然流产率为18.4%，对比正常人群15%的自然流产率，无明显差异。2010年，英国约翰•罗兰用冷冻22年的精液行卵细胞胞质内单精子注射（ICSI）后出生一名正常男婴，由此可以证明冷冻精子贮存的安全性。1981年卢光琇等首次在我国建立人类精子库，2001、2003年卫生部相继颁布了《人类精子库管理办法》、《人类精子库基本标准和技术规范》和《人类精子库伦理原则》，至2012年12月我国卫生部共批准建立了18家人类精子库。
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