女性生育力保存研究与应用

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6 z- \) J2 Z' f# z! ?6 j中华医学会生殖医学分会主任委员 乔 杰
5 o1 o/ i* m. r/ c生活方式的改变、晚婚晚育、卵巢功能低下、卵巢早衰的发病年龄提前等问题，均导致人类生殖能力的持续下降。此外，不能生育的人群，以及癌症治疗后生育能力下降的人群，均需要辅助生殖技术的帮助。人类辅助生殖技术的发展历程正是转化医学的最好体现。
　　兼顾“自用”与“他用”
9 K1 D/ D9 C" y8 e) ~/ `$ N$ m) S　　临床医生的工作一方面要找出导致人类生育能力下降的原因，另一方面则要想办法在生育能力下降之前就将生育力保存起来。
3 o! o+ f! ~% a; X　　以癌症为例，癌症治疗本身对卵巢就有一定的损害。如果一位女性30岁患癌症，经过放疗、化疗等各项治疗后，其卵泡储备就可能会下降到40岁的水平，尽管还有正常月经来潮，但是自然生育的可能性很小，即便怀孕，出现流产、胎儿畸形等问题的几率也要高于正常人群。如果再加上5年的化疗时间，那么待到35岁时，其卵巢中卵泡储备能力就下降到了45岁，此时怀孕的概率几乎为零。因此在女性开始化疗前，及时进行生育力的保存很重要。
! i/ V7 E- l( L, V" _4 z0 Q　　此外，可能需要生育力保存的人群还包括特殊职业从业人员、其他疾病需要卵巢切除的患者，以及推迟生育年龄者。
9 U5 ^8 C, _$ K　　女性生育力的保存就是通过深低温冷冻技术，提前将卵子、胚胎、卵巢组织或者完整的卵巢保存起来。待需要生育时再通过体外受精、卵巢移植等来获得生育力。女性生育力保存除了自用以外，还可以捐献去帮助他人，或用于科学研究，以探索人类生殖机理。
, J4 r+ H  t! D. @2 Y　　卵巢组织冷冻或现突破
& p' y7 F, a& C; k- k　　目前，胚胎冷冻技术已经非常成熟，在目前400多万试管婴儿里，应该有100多万使用了该项技术，而且该项技术的安全性已被充分证明。
2 k& c& w0 P* C) z  G/ o　　但由于必须要卵子与精子结合，因此该项技术只适用于已婚女性，对于未婚女性不适用。此外，对于那些对激素很敏感同时也没有时间促排卵的癌症患者也不适用。因此卵母细胞的保存还是一个重要的课题。
　　由于卵母细胞的纺锤体很易感，在深低温冷冻过程中会发生很多变化。我们目前的研究主要集中在其安全性的探讨，例如是成熟卵母细胞冷冻好，还是不成熟的卵母细胞冷冻好，冷冻后组蛋白的变化，年龄对其影响等。为方便卵母细胞的冷冻，我们还探索了冷冻载体，既方便又实用还能增加冷冻成功率，目前已完成卵巢冷冻技术。在2005年成功完成了一例包括精子冷冻、卵子冷冻之后，北医三院又成功完成了胚胎冷冻在内的“三冻”试管婴儿。这是中国的第一例、世界的第二例“三冻”试管婴儿。
　　关于卵巢的冷冻就涉及是组织冷冻，还是完整卵巢的冷冻。目前国际上做得比较多的是卵巢组织的冷冻。目前全世界只有14例成功，遗憾的是亚洲还没有。对于卵巢移植部位的选择，国际同行也进行了很多研究，例如移植到上臂、耻骨联合上，但依然存在很多争论，主要问题是卵泡消耗问题，以及卵巢组织的成活、新生血管形成的机制、移植的效果等。此外，能否进行完整的卵巢移植也是待研究的问题。
　　我们课题组也进行了相关研究。目前已经能够将小鼠的卵巢组织进行冷冻并移植到小鼠体内获得囊胚及其子代。人的卵巢组织移植到老鼠的皮下并获得卵泡，并在体外进行培养，但是没有进行受精或胚胎移植，因为涉及伦理问题，这样的胚胎不能直接移植回人体。
, Q5 X9 u( P' ^* [　　我们现在已经为44名癌症患者保存了卵巢组织，由于尚未确定哪种冷冻方法好，因此我们为所有卵巢组织分别进行了快冻和慢冻两种保存。由于这些患者尚未完成治疗，待将卵巢组织移植回人体至少还需要5年时间。同时为了减少癌症播散的危险，我们还做了卵泡的体外培养和卵巢的异种移植，这也是自然科学基金的重点项目，目前全世界只有4个课题组在进行相关研究。研究重点是人类卵泡分离的方法、卵泡的评估、卵泡的发育潜能、细胞的凋亡、基因表达等。目前我们能做到的是将患者不成熟的卵分离出来，在体外将其培养成熟，然后再冻起来备用。
　　进行卵泡体外培养相关研究还有更重要的意义。促排卵治疗的一个罕见但很严重的并发症是卵巢过度刺激综合征。患者会出现胸水、腹水、下肢血栓，甚至肝肾功能衰竭，危及患者生命。对于不孕症治疗而言，这是一个非常严重的并发症。因此对于可能发生卵巢过度刺激综合征患者，有了卵泡体外培养技术就可以绕过促排卵，直接取出不成熟的卵母细胞即可。